細胞株培養的具體無菌技術要點
：
1. 實驗開始前
，無菌室和無菌操作台需要紫外光照射30到60分鍾*滅菌
，用70%ethanol擦拭無菌操作台麵
，並且打開無菌操作台風扇運行10分鍾之後
，才可以進行實驗操作
。每次操作隻能處理一株細胞株
，即使培養基*相同也不可共用培養基
，以避免細胞間汙染或失誤混淆
。實驗完成後
，請將實驗物品拿出工作台
，用70%ethanol再次擦拭無菌操作台麵
。操作間隔應該讓無菌操作台運轉10分鍾到15分鍾後
，才能進行下一個細胞株的操作
。
2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞
，必要物品（試管架
、吸管
、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置
，其它實驗用品使用完畢後應移出
，有利於空氣流通
。實驗用品需70%ethanol擦拭後方可帶入無菌操作台內
。實驗操作過程應在台麵的無菌區域內完成
，請勿在邊緣非無菌區域進行操作
。
3. 小心取用無菌實驗物品
，避免細菌汙染
。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處
，也不要在打開的容器正上方進行操作
。容器打開後
，請用手夾住瓶蓋並輕握瓶身
，傾斜大約45°角取用
，盡量不要將瓶蓋口朝上放置於桌麵
。
4. 工作人員應當首先注意自身安全
，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套後才能進行實驗
。對於病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作
，並選擇適當等級的無菌操作台進行（至少是Class II）
。操作過程中
，應避免引起aerosol的產生
，小心有毒性藥品
，例如DMSO和TPA等
，並避免針頭的傷害等等
。
5. 定期檢測下列項目
：
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養箱的CO2濃度
、溫度、和水盤是否有汙染（水盤的水需用無菌水
，每周定時更換）
。
5.3. 無菌操作台內的airflow壓力
，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜
，預濾網（300小時/預濾網
，3000小時/HEPA）
。
6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750）
，需定期更換水槽中的水
。