使用過氧化物酶elisa 試劑盒進行試驗時 ，應分別以陽性對照與陰性對照控製試驗條件 ，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性 。有時本底較高 ，說明有非特異性反應 。

　　在ELISA中 ，進行各項實驗條件的選擇是很重要的 ，其中包括 ：

　　固相載體的選擇 ：許多物質可作為固相載體 ，如聚氯乙烯 、聚苯乙烯 、聚丙酰胺和纖維素等 。其形式可以是凹孔平板 、試管 、珠粒等 。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板 。不管何種載體 ，在使用前均可進行篩選 ：用等量抗原包被 ，在同一實驗條件下進行反應 ，觀察其顯色反應是否均一性 ，據此判明其吸附性能是否良好 。

　　包被抗體（或抗原）的選擇 ：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表麵時 ，要求純度要好 ，吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間 。吸附溫度 ，時間及其蛋白量也有一定影響 ，一般多采用4℃18～24小時 。過氧化物酶elisa 試劑盒蛋白質包被的適濃度需進行滴定 ：即用不同的蛋白質濃度（0.1 、1.0和10μg／ml等）進行包被後 ，在其它試驗條件相同時 ，觀察陽性標本的OD值 。選擇OD值大而蛋白量少的濃度 。對於多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml 。

　　除此之外還要注意以下事項 ：

　　1.確定elisa 試劑盒在有效期內 ；

　　2.仔細閱讀說明書 ；

　　3.按說明書確定所有試劑齊全（數量 、體積） ；

　　4.標本製備要規範 ，每份標本體積要按2-3個複孔以上的量製備 ，盡量分裝做備份 。短期內無法實驗者 ，注意低溫保存 ；

　　5.根據檢測標本數量確定所需試劑的量 ；

　　6.準備好所有實驗額外所需物品 ，如試管 、吸頭 、移液器 、離心機等 ；

　　7.過氧化物酶elisa 試劑盒按說明書將所用試劑平衡至室溫 ，配製所需試劑 。