樣本處理及要求 :
1. 血清
:室溫血液自然凝固10-20分鍾
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如出現沉澱
,應再次離心
。
2. 血漿
:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑
,混合10-20分鍾後
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如有沉澱形成
,應該再次離心
。
3. 尿液
:用無菌管收集
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。胸腹水
、腦脊液參照實行
。
4. 細胞培養上清
:檢測分泌性的成份時
,用無菌管收集
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。檢測細胞內的成份時
,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液
,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融
,以使細胞破壞並放出細胞內成份
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
5. 組織標本
:切割標本後,稱取重量
。加入一定量的PBS
,PH7.4
。用液氮迅速冷凍保存備用
。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度
。加入一定量的PBS(PH7.4)
,用手工或勻漿器將標本勻漿充分
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。分裝後一份待檢測
,其餘冷凍備用
。
6. 標本采集後盡早進行提取
,提取按相關文獻進行
,提取後應盡快進行實驗
。若不能馬上進行試驗
,可將標本放於-20℃保存
,但應避免反複凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性
。