老哥俱乐部

样品 RNA 的制备

如果有N个样品，*设置N+2个提取
，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC
。另外用水作为NC。 用自选方法纯化样品的RNA

，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容
。也以选购本公司的柱式病毒RNAout。本试剂盒免费赠送20次免RNA提取的核酸释放剂试用装，该释放剂的裂解液可以直接作为RT-PCR模板，省略了RNA提取步骤。

数据处理

如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴
，以 Ct值为纵轴，绘制标准曲线
。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品RNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。把本试剂盒用于定性检测
，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40

。阳性对照必须有荧光对数增长
，有典型扩增曲线
，Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品
，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性
。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 35，则为阳性

。

上一篇 猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒（荧光探针法）注意事项 下一篇 驴黄体生成素（LH）elisa试剂盒操作注意事项