注意事項 ：
1．邊緣效應 使用96孔板的ELISA測定中 ，常發現有“邊緣效應" ，即外周孔顯色較中心孔深 。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所 。聚苯乙烯本身為不良熱導體 ，在實驗室的常規ELISA測定中 ，將板從室溫（通常在25℃左右）置於37℃溫箱 ，板也升溫時 ，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度 。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時 ，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃） ，就可以很容易地排除“邊緣效應" ，並且可提高測定的重複性 。 
2．加樣在現在的ELISA商品試劑盒中 ，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟 。注意的關鍵點是 ：加樣不可太快 ，要避免加在孔壁上部 ，不可濺出和產生氣泡 。加樣太快 ，無法保證微量加樣的準確性和均一性 。加在孔壁上部的非包被區 ，易導致非特異吸附 。濺出會對鄰近孔產生汙染 。出現氣泡則反應液界麵有差異。所以 ，有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性 ，下次測定為陰性 ，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致 。

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