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NF-KB ELISA定量試劑盒使用前該做些什麽準備
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:2019-12-21
NF-KB ELISA定量試劑盒使用前該做些什麽準備
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NF-KB ELISA定量試劑盒在收集樣本前都必須有一個完整的計劃
,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定
。對收集後當天就進行 檢測的樣本
,及時儲存在4℃備用
。對於隔天再檢測的樣本
,及時分裝後凍存在-20℃備用
,有條件的
,-70℃凍存備用
。標本應避免反複凍融
。
液體類標本: 包括血清
、血漿
、尿液
、胸腹水
、腦脊液
、細胞培養上清等
。
①
、血清
:室溫血液自然凝固10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
②
、血漿
:應根據標本的要求選擇EDTA
、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑
,混合10-20分鍾後
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
③
、尿液
:用無菌管收集。NF-KB ELISA定量試劑盒離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。胸腹水
、腦脊液參照此實行
。
④、細胞培養上清
: 檢測分泌性的成份時
,用無菌管收集
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。
⑤
、培養細胞
:檢測細胞內的成份時
,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液
,細胞濃度達到100萬/ml左右
。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑
,以使細胞破壞並放出細胞內成份
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
⑥
、組織標本
:NF-KB ELISA定量試劑盒切割標本後
,稱取重量
。加入一定量的PBS
,PH7.4
。用液氮迅速冷凍保存備用
。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度
。加入一定量的PBS(PH7.4)
,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。分裝後一份待檢測
,其餘冷凍備用
。
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