老哥俱乐部

实验条件
固相载体
：可作为固相载体的物质很多，如：纤维素

、聚丙烯酰胺
、聚苯乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃
、硅橡胶
、琼脂糖凝胶等。可以各种形式出现；试管、微量反应板凹孔
、小珠.....
。zui常用的是聚苯乙烯制品
，其吸附性。固相包被的机制一般不外乎物理吸附和共价交联
，
封闭
：以无关蛋白占据载体上未被包被的空隙，常用的封闭液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待测样品
：稀释度要合适，浓度太大会发生非特异性吸附造成假阳性，过分稀释会影响抗原-抗体之间的免疫学反应
。选择zui适稀释度
，在实验体系中取光密度在1.0左右的稀释度为宜
。
酶结合物：使用高质量的酶结合物是elisa成功的关键。
ELISA试剂盒SCI文章注意事项
酶联免疫技术的试剂标准化问题尚未完*
，温育过程的时间、温度
、洗涤液的种类及洗涤次数都是影响zui后测定的因素
。为使实验得到满意的结果
，在操作过程中应作到
1
、每次试验都必须设阳性和阴性对照。
2、封闭要*
。
3
、洗涤要测定。

ELISA试剂盒SCI文章操作流程
：
检测抗体多用间接型elisa。以纯化抗原包被载体
，经4℃
，以无关蛋白封闭至少2小时以上，加入待测样品，室温孵育1小时，洗涤干净后加酶标抗体
，再经室温孵育
、洗涤后
，以底物显色
，显色到一定程度终止反应，在酶标仪上读结果或以肉眼判断
。
类型：elisa具体方法的类型繁多，试剂的标准化问题还未zui后解决，温育的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数等都是影响测定的因素。但参考以上基本过程，无论怎样变化，均离不开抗原-抗体反应
、酶标抗体的免疫学反应及酶催化作用。
特点：
1、敏感性高
，可检出浓度在ug~mg/ml水平；
2
、特异性强

；
3、重复性好
；
4、快速、简便
、廉价。

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