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ELISA試劑盒SCI文章操作流程及實驗條件
點擊次數 :987 更新時間 :2019-09-18

實驗條件
固相載體 :可作為固相載體的物質很多 ,如 :纖維素 、聚丙烯酰胺 、聚苯乙烯 、聚丙烯 、交聯葡聚糖 、玻璃 、矽橡膠 、瓊脂糖凝膠等 。可以各種形式出現 ;試管 、微量反應板凹孔 、小珠..... 。zui常用的是聚苯乙烯製品 ,其吸附性 。固相包被的機製一般不外乎物理吸附和共價交聯 ,
封閉 :以無關蛋白占據載體上未被包被的空隙 ,常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清 。
待測樣品 :稀釋度要合適 ,濃度太大會發生非特異性吸附造成假陽性 ,過分稀釋會影響抗原-抗體之間的免疫學反應 。選擇zui適稀釋度 ,在實驗體係中取光密度在1.0左右的稀釋度為宜 。
酶結合物 :使用高質量的酶結合物是elisa成功的關鍵 。
ELISA試劑盒SCI文章注意事項
酶聯免疫技術的試劑標準化問題尚未完* ,溫育過程的時間 、溫度 、洗滌液的種類及洗滌次數都是影響zui後測定的因素 。為使實驗得到滿意的結果 ,在操作過程中應作到
1 、每次試驗都必須設陽性和陰性對照 。
2 、封閉要* 。
3 、洗滌要測定 。

ELISA試劑盒SCI文章操作流程 :
檢測抗體多用間接型elisa 。以純化抗原包被載體 ,經4℃ ,以無關蛋白封閉至少2小時以上 ,加入待測樣品 ,室溫孵育1小時 ,洗滌幹淨後加酶標抗體 ,再經室溫孵育 、洗滌後 ,以底物顯色 ,顯色到一定程度終止反應 ,在酶標儀上讀結果或以肉眼判斷 。
類型 :elisa具體方法的類型繁多 ,試劑的標準化問題還未zui後解決 ,溫育的時間 、溫度 、洗滌液的種類及洗滌次數等都是影響測定的因素 。但參考以上基本過程 ,無論怎樣變化 ,均離不開抗原-抗體反應 、酶標抗體的免疫學反應及酶催化作用 。
特點 :
1 、敏感性高 ,可檢出濃度在ug~mg/ml水平 ;
2 、特異性強 ;
3 、重複性好 ;
4 、快速 、簡便 、廉價 。

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