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人胃生长素（Grelin）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒操作步骤
点击次数：985 更新时间：2019-09-04
1.标准品的加样：设置标准品孔和样本孔 ，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL ；。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部 ，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.加酶 ：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
4.温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5.配液 ：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 。
6.洗涤 ：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干 。
7.显色 ：每孔先加入显色剂A50μl ，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
8.终止：每孔加终止液50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9.测定 ：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。