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酶標記物包括哪些及注意事項
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:2019-03-21
酶標記物包括酶標記抗原 、酶標記抗體和酶標記SPA等 。酶標記物質量的好壞直接關係到免疫酶技術的成功與否 ,因此被稱為關鍵的試劑 。酶標記物中常用的是酶標記抗體 ,它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成 。酶標記抗體的質量主要取決於純度好 、活性強及親和力高的酶和抗體 ,其次要有良好的製備方法。目前 ,高質量的酶(如辣根過氧化物酶 ,簡稱HRP)國內已有商品供應 。高質量的抗體則可通過提取純化而獲得 。在製備方法上 ,宜選用產率高 、不影響結合物的活性和不混雜幹擾性物質且操作簡便易行的方法 。
注意事項
1. 在具備高質量HRP的條件下
,所要標記的抗體也要活性高,效價高(低1∶16),純度
高
,親和力好
,這是保證標記物效價高
,免疫活性好的首要條件
。
2. 所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴格掌握
。所用試劑
,*(或必需)新鮮配
製
。如在戊二醛標記法中所用戊二醛應為新鮮純品
,因戊二醛儲存過久可形成縮和體(雜
質)
。否則
,影響標記效果
。
3. 室溫攪拌時須避光
,室內溫度一般在25℃為宜
。標記物每次透析前
,須認真檢
查
,防止漏液
。
4. 濃的標記物相當穩定
,常加入30~40%甘油於-10℃下保存
。4℃可保存1~2年
,但稀釋成1∶10
,隻能保存數周
。已配製的使用液應在12小時內用完
。切忌反複凍融
。