ELISA實驗看似簡單 ,其實不然 。記得以前一個同學*次做ELISA實驗 ,跟我說 ,ELISA實驗簡直太簡單了 ,到第2次在次做ELISA實驗的時候 ,他驚訝了 ,說結果差別怎麽這麽大(同一份標本) ,第三次的時候,他決定認真的做一次 ,爭取做到同一份標本 ,這次讓他感受到ELISA並不是那麽簡單 ,發覺其實挺難的 。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧 ,希望對大家有所幫助 !
1.操作前應對實驗的物理參數有充分的了解 ,如環境溫度(保持在18C~25℃) 、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等 ,要先查看水育箱溫度 ,ELISA試劑盒是否符合要求 。
2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑 ,避免刮擦包被板底部 。加樣過程中避免液體外濺 ,血清殘留在反應孔壁上 ,加樣器吸頭要清洗幹淨 ,避免汙染 ,加樣次序要與說明書一致 ,否則可導致結果錯誤 ,實驗重複性差 。
3.手工洗板加洗液時衝擊力不要太大 ,洗滌次數不要超過說明書的洗滌次數 ,洗液在反應孑L內滯留的時間不宜太長 。不要使洗液在孑L間竄流 ,造成孔問汙染 ,導致假陰性或假陽性 。
4.要保證加液量一致ELISA試劑盒老哥俱樂部在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好 ,滴瓶不易控製加液量不準,造成顯色不統一 ,判斷錯誤 。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環境不能處於陽光直射的環境下 ,加顯色係統後要避光反應 ,顯色液量不能過多 ,以免顯色過強 。
ELISA試劑盒的影響因素應選用質量靠得住的產品 ,不能圖便宜 ,忽視質量保證 。試劑應妥善保存於4℃冰箱內 ,在使用時先平衡至室溫 ,不同批號的試劑組分不宜交叉使用 。試劑開啟後要在一周內用完 ,剩餘的試劑下次用時應先檢查是否變質 ,顯色劑如被汙染變色將造成全部顯色 ,導致錯誤結果 。
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