在使用IRF1 ELISA定量試劑盒做實驗的時候 ，有些細節若是做不好會出現實驗異常 ，或者效果不佳 ，那麽你有想過是什麽原因嗎 ？

　　一·白板異常 ：顯色步驟結束後 ，酶標板所有孔均無顏色 。陽性對照不顯色 。

　　這可能是因為 ：

　　1. 試劑已過效期 ，或不同試劑盒組分混用（解決方式 ：檢查試劑的組分及批號 ，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒 。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用） 。

　　2. 錯加 、漏加試劑底物 、顯色劑 A或B（解決方式 ：嚴格按說明書的步驟操作 ，加完試劑後可觀察一下液麵高度是否一致 ，以減少漏加現象） 。

　　3. 洗板及加樣過程中 ，酶標受汙染失活失去催化顯色劑顯色的能力（解決方式 ：確認盛酶標的容器不含酶抑製劑如疊氮鈉等 ，確認配製洗液的容器已洗幹淨） 。

　　4. 終止液誤作洗滌液稀釋或當底物緩衝液配製（解決方式 ：每次配製時都應看清標簽標明物質） 。

　　5. 蒸餾水有問題（解決方式 ：確認配製洗液的純化水達到要求且未汙染 ，與好蒸餾水比較） 。

　　二·顯色弱 、靈敏度低 ：實驗結束後 ，包括陽性對照 、質控在內的所有板孔顏色均較淡 。

　　這可能是因為：試劑盒超過期 ， 超過有效期的產品可能會產生很弱的信號 ；試劑盒沒有按規定進行保存 ，受高溫影響（實驗前檢查試劑的組分及批號 ，確認試劑未過期 。不要將試劑盒長時間置於常溫下 ，按使用規定儲藏） 。

　　1. 試劑 、樣品用前未平衡至室溫 。如何解決 ？從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應置室溫平衡 20分鍾左右 。

　　2. 加入試劑的體積和時間有誤 ，移液器計量不準 ，吸嘴內水分太多或不清潔 。如何解決 ？確定所使用的試劑體積正確 ，加入時間適當 。 校正移液器 ，移液器與吸嘴配合要緊密吻合 。移液不宜太快 ，排放應* 。

　　3. IRF1 ELISA定量試劑盒洗板及加樣過程中 ，酶標受汙染失活而失去催化顯色劑顯色的能力 。如何解決 ？確認盛酶標的容器不含酶抑製劑如疊氮鈉等 ，確認配製洗液的容器已洗幹淨 ，確認配製洗液的純化水達到要求且未受汙染 。

　　4. 孵育時間及孵育溫度未達到要求  ，反應板放入培養箱時注意溫度並及時調整 。如何解決 ？孵育溫度應控製在 37-38℃ ，孵育時間嚴格按照說明書操作 。 保溫期內不宜多開門 ，以免影響保溫 。

　　5. 洗板次數過多 ，或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求 ；洗滌衝擊力太大 。浸泡時間太長 。如何解決 ？嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板 ，減小洗滌衝擊力 ，按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數 。

　　6. 顯色劑加量不足或順序顛倒 ，或混合後加入。如何解決 ？顯色劑滴瓶垂直向下 ，持力均勻 ，滴速不宜過快 ，先加顯色劑 A ，後加顯色劑B ，不可將A 、B液混合後加入

　　7. 底物作用時間不夠 。如何解決 ？準確定時 。

　　8. 蒸餾水水質有問題 。如何解決 ？測定蒸餾水配製試劑對酶免疫法的影響 。

　　三·IRF1 ELISA定量試劑盒實驗結束後 ，陰陽性對照正常 ，質控正常 ，但臨床標本感覺顯色較弱

　　1. 待測標本中可能不含強陽性標本 ，故結果可能是正常的（解決方式 ：如有懷疑 ，可複檢） 。

　　2. 標本加入疊氮鈉作為防腐劑（解決方式 ：酶免實驗中的標本禁用疊氮鈉作為防腐劑 ，可選用 proclin 、硫柳汞等其他防腐劑） 。

　　四·陰陽性對照正常 ，但質控 、參考品或個別弱陽性標本未能檢出 。

　　1. 未達要求的孵育溫度及孵育時間可檢出強陽性標本 ，但質控或弱陽性標本受 溫度變化影響較大而被未檢出（解決方式 ：質控品或標本避免反複凍融 。標本在一周內使用的 ，可存於 2-8℃ ，如需保存 ，應置於-20℃以下保存 。質控品應小量分裝 ，並置於-20℃以下保存） 。

　　2. 質控品或標本高溫放置過久 ，或被反複凍融致待測物滴度下降 ，而未能檢出（解決方式 ：重新設定酶標儀的參數 ，特別是檢查濾光片是否匹配） 。

　　3. IRF1 ELISA定量試劑盒儀器設定不正確 ，濾光片不匹配（解決方式 ：重新設定酶標儀的參數 ，特別是檢查濾光片是否匹配） 。