今天來給朋友們說說相關實驗方法
,就是相關ELISA的
,這個方法的試劑盒在我公司的產品中是非常齊全的
,而且種屬也是繁多的
。下麵老哥俱樂部來看進口試劑盒講解ELISA法轉錄因子活性的特點與流程
。
老哥俱樂部首先來看看特點
:
1
、靈敏度比凝膠遷移實驗高10倍
。轉錄因子水平小的變化就能對細胞功能產生的影響
,因此
,在研究轉錄因子時采用靈敏的方法是非常重要的
。
2
、特異性強
。為了保證轉錄因子特異與標記探針DNA結合
,試劑盒提供了未標記寡核苷酸片段(含有與標記探針相同的轉錄因子結合位點)
。此片段能夠與探針競爭結合轉錄因子
,減弱信號強度
。突變型的未標記寡核苷酸片段則不能與標記探針競爭結合轉錄因子改變信號強度
。此外
,抗轉錄因子一抗特異與轉錄因子結合
,與其他蛋白無交叉反應
,確保試劑盒的特異性
。
3
、快速
。EMSA需要凝膠電泳
,操作費時又不方便
。使用轉錄因子活性ELISA檢測試劑盒
,能夠在5h內得到結果
。
4
、方便
、安全
。不涉及放射性
,不用電泳
。
5
、可同時檢測1~96個樣品
。
6
、能夠檢測組織及細胞樣品
。
再一個就是流程
:
1
、核蛋白抽提物中轉錄因子與標記探針結合形成轉錄因子/探針複合物
。
2
、轉錄因子/探針複合物與微孔板上鏈親和素結合固定在微孔板上
。
3
、抗轉錄因子一抗與轉錄因子結合
。
4
、HRP酶標二抗與一抗結合
。
5
、HRP作用於底物發生顏色改變
,顏色深淺與轉錄因子DNA結合活性成正比
。