一般來說 ，消化時間和組織切片固定的長短呈正比 。在用酶消化與熱批改後均不能取得效果的前提下運用抗原批改與酶消化聯絡的方法 ，有時會取得較為滿意的效果 。一般常用蛋白酶K和微波相聯絡 ，但應留心 ，無論何種性質的抗原檢測均可能會在核內出現假陽性反應 。因此有必要要做對照 。

ELISA試劑盒操作中還應留心如下疑問 ：

1 、熱處理後應留心天然冷卻 。
2 、熱處理時要避免切片單調 。
3 、應根據不一樣的抗體選擇適合的抗原批改方法 。
4 、同一批抗原的檢測所用溫度和時間確保一致 。
5 、留心形態學結構的改動（一般經高溫批改後胞漿會明顯被損壞 ，對細胞核的影響較大 ，會出現核分裂與蘇木到淡染等現象 ；而經酶水解的切片 ，其細胞漿損壞視消化時間長短而異 ，但核損壞較輕） 。6 、如果在常用的緩衝液中無法完成抗原批改 ，或經批改後的抗原定位發作改動 ，可改用一些不常用的緩衝液 ，或加一些螯合劑 ，如EDTA等可改進某些抗原的批改 。

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