在實際應用中 ，通過不同的設計 ，具體的方法步驟可有多種。即:用於檢測抗體的間接法 、用於檢測抗原的雙抗體夾心法以及用於檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等 。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法 。
方法一 用於檢測未知抗原的雙抗體夾心法 ：
1. 包被 ：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩衝液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml 。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml ，4℃過夜 。次日 ，棄去孔內溶液 ，用洗滌緩衝液洗3次 ，每次3分鍾 。（簡稱洗滌 ，下同） 。
2. 加樣 ：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml於上述已包被之反應孔中 ，置37℃孵育1小時 。然後洗滌 。（同時做空白孔 ，陰性對照孔及陽性對照孔） 。
3. 加酶標抗體 ：於各反應孔中 ，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定後的稀釋度）0.1ml 。37℃孵育0.5～1小時 ，洗滌 。
4. 加底物液顯色 ：於各反應孔中加入臨時配製的TMB底物溶液0.1ml ，37℃10～30分鍾5. 終止反應 ：於各反應孔中加入2M硫酸0.05ml 。
6. 結果判定 ：可於白色背景上 ，直接用肉眼觀察結果 ：反應孔內顏色越深 ，陽性程度越強 ，陰性反應為無色或極淺 ，依據所呈顏色的深淺 ，以“+” 、“-”號表示 。也可測O?D值 ：在ELISA檢測儀上 ，於450nm（若以ABTS顯色 ，則410nm）處 ，以空白對照孔調零後測各孔O?D值 ，若大於規定的陰性對照OD值的2.1倍 ，即為陽性 。
方法二 用於檢測未知抗體的間接法：
1. 用包被緩衝液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml ，每孔加0.1ml ，4℃過夜 。
2. 次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml於上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌 。同時做空白 、陰性及陽性孔對照於反應孔中 ，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml ，37℃孵育30-60分鍾 ，洗滌,後一遍用DDW（超純水）洗滌 。其餘步驟同“雙抗體夾心法”的4 、5 、6。
3. 加底物液顯色 ：於各反應孔中加入臨時配製的TMB底物溶液0.1ml ，37℃10～30分鍾 。4. 終止反應 ：於各反應孔中加入2M硫酸0.05ml 。
5. 結果判定 ：可於白色背景上 ，直接用肉眼觀察結果 ：反應孔內顏色越深 ，陽性程度越強 ，陰性反應為無色或極淺 ，依據所呈顏色的深淺 ，以“+” 、“-”號表示 。也可測O?D值 ：在ELISA檢測儀上 ，於450nm（若以ABTS顯色 ，則410nm）處 ，以空白對照孔調零後測各孔O?D值 ，若大於規定的陰性對照OD值的2.1倍 ，即為陽性 。
phospho-EGFR (Tyr1125) 骨形態發生蛋白7抗體
Phospho-EGFR (Tyr1148) 骨形態發生蛋白6抗體
phospho-EGFR (Tyr1172) 骨形態發生蛋白4抗體
Phospho-EGFR (Tyr1173) 骨形態發生蛋白3抗體
phospho-EGFR (Tyr1197) 骨形態發生蛋白2抗體
Phospho-EGFR (Tyr845) 骨涎蛋白抗體
phospho-EGFR (Tyr869) 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人
Phospho-EGFR (Tyr992) 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)大鼠,小鼠
Phospho-EGFR (Tyr998) 骨骼肌烯醇化酶抗體
Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體
phospho-EIF4B (Ser422) 骨成型蛋白受體1A抗體