具有活絡
、特異、簡略
、快速
、安穩及易於自動化操作等特色
。不隻適用於臨床標本的查看
,並且因為一天之內能夠查看幾百乃至上千份標本,因而
,也適合於血清流行病學調查
。ELISA法是免疫確診中的一項新技術
,現已成功地應用於多種病原微生物所引起的流行症
、寄生蟲病及非流行症等方麵的免疫確診
。也已應用於大分子抗原和小分子抗原的定量測定
,依據現已運用的成果
,本法不隻能夠用來測定抗體
,並且也可用於測定體液中的循環抗原
,所以也是一種前期確診的傑出辦法
。
操作流程如下
:
(1)待測樣品孔中每孔參加待測樣品100μl
,每種樣品設3個平行孔
;設兩個陰性對照孔
,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl
;另設一個空白對照孔
,參加純細胞裂解液100μl
。 (2)酶標板置4℃
,包被
。
(3)洗板
:吸幹孔內反響液
,用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔後
,即甩去)
,之後將洗刷液注滿板孔
,浸泡1-2分鍾
,間歇搖擺
。甩去孔內液體後在吸水紙上拍幹
。重複洗刷3-4次
。
(4)陰性對照孔每孔參加PBS 50μl
,樣品孔及空白孔每孔參加1
:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl
。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內
,孵育60min
。
(6)洗板
,同(4)
。
(7)每孔加1
:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl
。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內
,孵育60min
。
(9)洗板
,同(4)
。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl
,悄悄混勻10s
,置37℃暗處反響15-20min
。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反響
。
(12)別離測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2
,終究測得的OD值為兩者之差(W1-W2)
,以削減由容器上的劃痕或指印等形成的光幹擾
。
(13)數據處理
:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值後
,核算S/N值
。S/N≥2.1為陽性斷定規範
。
Isosorbide (75% solution) 1g 異75%溶液標準品 652-67-5
Isotretinoin 200mg 標準品 4759-48-2
Isoxsuprine Hydrochloride 200mg 異舒普林鹽酸鹽標準品 579-56-6
Isradipine 200mg 依拉地平標準品 75695-93-1
Itraconazole 100mg 標準品 84625-61-6
Ivermectin 200mg 依維菌素標準品 70288-86-7
Kawain 200mg 醉椒素標準品 500-64-1
KDN 100mg 凱迪恩標準品 22594-61-2
Ketoconazole 200mg 標準品 65277-42-1
Ketoprofen 200mg 標準品 22071-15-4
Ketorolac Tromethamine 200mg 標準品 74103-07-4
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