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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒陰性對照孔操作流程
點擊次數 :1386 更新時間 :2018-04-17

具有活絡 、特異、簡略 、快速 、安穩及易於自動化操作等特色 。不隻適用於臨床標本的查看 ,並且因為一天之內能夠查看幾百乃至上千份標本,因而 ,也適合於血清流行病學調查 。ELISA法是免疫確診中的一項新技術 ,現已成功地應用於多種病原微生物所引起的流行症 、寄生蟲病及非流行症等方麵的免疫確診 。也已應用於大分子抗原和小分子抗原的定量測定 ,依據現已運用的成果 ,本法不隻能夠用來測定抗體 ,並且也可用於測定體液中的循環抗原 ,所以也是一種前期確診的傑出辦法 。
操作流程如下 :
(1)待測樣品孔中每孔參加待測樣品100μl ,每種樣品設3個平行孔 ;設兩個陰性對照孔 ,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl ;另設一個空白對照孔 ,參加純細胞裂解液100μl 。 (2)酶標板置4℃ ,包被 。
(3)洗板 :吸幹孔內反響液 ,用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔後 ,即甩去) ,之後將洗刷液注滿板孔 ,浸泡1-2分鍾 ,間歇搖擺 。甩去孔內液體後在吸水紙上拍幹 。重複洗刷3-4次 。
(4)陰性對照孔每孔參加PBS 50μl ,樣品孔及空白孔每孔參加1 :500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl 。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內 ,孵育60min 。
(6)洗板 ,同(4) 。
(7)每孔加1 :5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl 。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內 ,孵育60min 。
(9)洗板 ,同(4) 。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl ,悄悄混勻10s ,置37℃暗處反響15-20min 。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反響 。
(12)別離測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2 ,終究測得的OD值為兩者之差(W1-W2) ,以削減由容器上的劃痕或指印等形成的光幹擾 。
(13)數據處理 :在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值後 ,核算S/N值 。S/N≥2.1為陽性斷定規範 。
Isosorbide (75% solution)    1g    異75%溶液標準品    652-67-5 
Isotretinoin     200mg    標準品    4759-48-2 
Isoxsuprine Hydrochloride     200mg    異舒普林鹽酸鹽標準品    579-56-6 
Isradipine     200mg    依拉地平標準品    75695-93-1 
Itraconazole    100mg    標準品    84625-61-6 
Ivermectin     200mg    依維菌素標準品    70288-86-7 
Kawain    200mg    醉椒素標準品    500-64-1 
KDN    100mg    凱迪恩標準品    22594-61-2 
Ketoconazole     200mg    標準品    65277-42-1 
Ketoprofen     200mg    標準品    22071-15-4 
Ketorolac Tromethamine     200mg    標準品    74103-07-4 

 

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