此法采用定量夾心酶聯免疫技術 。特異性抗體對於C7已經被預先塗到微孔板 。標準和樣品吸入井和任何C7目前的固定抗體的約束 。共軛的抗體特異於C7除去任何未結合的物質後 ，加入到孔中 。抗蛋白共軛的辣根過氧化物酶（HRP）的洗滌後 ，加入到孔中。經過洗滌 ，以除去任何未結合的抗蛋白的酶試劑 ，底物溶液加入到孔中 ，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的C7。彩色顯影被停止並測量的顏色的強度 。
1 。準備好所有試劑 ，工作標準和樣品在前麵的章節中 。
2 。請確定井數的使用 ，並把任何剩餘的井和入袋幹燥劑 ，密封保鮮袋 ，將未使用的井在4°C的含量布局表
 。每孔加入100μl的標準和樣品 。封麵用膠粘帶提供 。孵育2小時 ，在37℃下一盤布局記錄標準和樣品檢測 。
4 。每孔中取出的液體 ，不洗 。
5 。向每孔中加入100μl抗體（1倍） 。蓋上一個新的膠粘帶 。孵育1小時 ，在37℃下（抗體（1X）可能會出現混濁 。預熱至室溫 ，輕輕混勻 ，直到出現均勻解決方案 。）
6 。吸液的各孔和洗滌 ，共洗滌三次重複該過程兩次 。洗淨 ，每孔填充洗滌緩衝液（200μL）使用噴瓶 ，多道移液器 ，歧管器 ，或autowasher ，和 ，靜置2分鍾 ，*清除液體的每一步是*的良好的性能 。zui後一次洗滌後 ，清除任何剩餘洗滌緩衝液的吸ordecanting 。倒置板和塗抹對幹淨的紙巾 。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗蛋白（1×） 。量的微量滴定板 ，用一個新的粘接劑條 。溫育1小時 ，在37℃下
8 。重複的願望/洗滌過??程中 ，在步驟6的5倍 。
9 。將90μlTMB底物添加到每個孔中 。孵育15-30分鍾 ，在37℃下避光
10 。一站式解決方案 ，每孔加入底物 ，輕輕晃動酶標板 ，以確保充分混合 。
11 。在5分鍾內 ，設置至450nm ，使用酶標儀測定各孔的光密度 。如果波長校正 ，設置為540nm或570nm處 。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數減去讀數 。該減法校正板的光學缺陷 。在450nm處未經修正讀數直接 ，可能會比較高 ，不太準確 。
美司那相關物質B標準品    50mg
美司那相關物質A標準品    50mg
相關物質混合物標準品    50mg
琥珀酸舒馬曲坦相關物質C標準品    50mg
標準品(係統適應用)    50mg
甘羅溴銨相關物質A標準品    50mg
釓雙胺相關物質B標準品    50mg
釓雙胺相關物質A標準品    50mg
溶液混合物標準品    50mg
二十三烷酸甘油三酯標準品    50mg
相關物質合劑標準品    50mg
地克珠利係統適用性合劑標準品    50mg
相關物質A標準品    50mg
相關物質A標準品    50mg
苯托沙敏相關物質A標準品    50mg

 

上一篇 VE Elisa Kit,GSK Elisa Kit的安全性和自備材料 下一篇 VE Elisa Kit,GSK Elisa Kit實驗必知小知識分享