結合物即酶標記的抗體（或抗原） ，是ELISA中zui關鍵的試劑。良好的結合物應該是既保有酶的催化活性 ，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性 。結合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當的分子比例 ，在結合試劑中應盡量不含有或少含有遊離的（未結合的）酶或遊離的抗體（或抗原） 。此外 ，結合物尚要有良好的穩定性 。    
用於ELISA的酶應符合以下要求 ：純度高 ，催化反應的轉化率高 ，專一性強 ，性質穩定 ，來源豐富 ，價格不貴 ，製備成酶結合物後仍繼續保留它的活性部分和催化能力 。在受檢標本中不存在相同的酶 。另外 ，它的相應底物易於製備和保存 ，價格低廉 ，有色產物易於測定等。     在ELISA中 ，常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和堿性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP) 。在少數商品ELISA試劑中 ，應用的酶尚有葡萄糖氧化酶 、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等 。     國產ELISA試劑一般都用HRP製備結合物 。HRP是一種糖蛋白 ，含糖量約為18% ，分子量為44000 ，是一種複合酶 ，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結合而成 ，是一種卟啉蛋白質 。主酶無色糖蛋白在275nm波長處有吸收峰 ，輔基是深棕色的含鐵卟啉環 ，在403nm波長處有吸收峰。HRP的純度用RZ(Reinheit Zahl ，德文 ，意為純度數）表示 ，是403nm的吸光度與280nm吸光度之比 ，高純度的HRP的RZ≥9.0。     HRP除符合上述的ELISA中標記酶的要求外 ，更有價格低廉和性質較穩定的特點 。值得注意的是 ，在選用酶製劑時 ，除其純度RZ外 ，更應注意酶的活力 。高純度的酶如保存不當 ，活力也會降低。酶製劑的活力以所含的酶活力單位表示 ，可用對底物作用後生成產物量的測定進行試驗 。    
國外很多試劑采用堿性磷酸酶（AP）作為標記酶 。常用的AP有兩個來源 ，分別從大腸杆菌和小牛腸膜中提取 。不同來源的酶生化特性特性略不相同，從大腸杆菌中提取的AP分子量為80000 ，酶作用的pH為8.0 ；用小牛腸膜中提取的AP分子量為100000 ，zui適pH為9.6 。在ELISA中 ，AP係統的敏感度一般高於HRP係統 ，空白值也較低 ，但AP價格昂貴 ，製備結合物所得率也較HRP低。
300mg    78439-06-2    五水合物標準品    Ceftazidime Pentahydrate
300mg        類薑黃素標準品    Curcuminoids
300mg    5870-29-1    鹽酸環噴托酯標準品    Cyclopentolate Hydrochloride
300mg    2438-32-6    馬來酸右標準品    Dexchlorpheniramine Maleate
300mg    562-10-7    琥珀酸多西拉敏標準品    Doxylamine Succinate
300mg    8067-24-1    甲磺酸雙氫麥角堿標準品    Ergoloid Mesylates
300mg    13517-23-2    依替膦酸鈉相關物質A標準品    Etidronate Disodium
300mg    75607-67-9     標準品    Fludarabine Phosphate 

 

上一篇 抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒在實驗中應具備以下幾個因素 下一篇 抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒吸取液體時速度不易太快