是一種分子量為8～10kD的多肽 ，對嗜中性粒細胞 ，T淋巴細胞 、嗜鹼性粒細胞具有趨化作用 ，並可激活嗜中性粒細胞 ，是一種重要的炎症介質 。在嚴重感染病人的血清中 、炎症局部滲出液中都可檢測到高水平的IL-8 。此外 ，近年來的研究表明 ，IL-8可能與各種組織缺血後再灌注損傷的發生有關 。老哥俱樂部采用兩株自製的單克隆抗體建立了夾心法ELISA用於檢測IL-8 ，敏感性可達156Pg/ml ，操作簡單 ，重複性良好，可用於IL-8的基礎和臨床研究 。
一 、原理
         采用兩株識別不同表位的抗IL-8單克隆抗體 ，其中一株(4D7)作為包被抗體 ，以識別和結合待檢標本中的IL-8,另一株作為酶標抗體 ，與結合於包被抗體的IL-8的另一個表位結合並催化底物顯色 。
二 、試劑器材
1. 試劑盒提供包被抗體 、酶標抗體、標準品 ，底物(ABTS)、96孔elisa板 。
2. 包被緩衝液 、PBS 、底物緩衝液配製同常規ELISA法 。
三 、操作步驟
1. 包被 ：pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔 ，放4℃,36小時 。
2. 封閉 ：0.1%吐溫PBS(Buffer A)衝洗96孔板三次 ，加3%BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔 ，放37℃,1小時 。
3. 加待檢樣品 ：Buffer A 衝洗96孔板三次 ，加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標準品100μl/孔 ，放37℃,3小時 。
4. 加酶標抗體 ：Buffer A衝洗96孔板五次,3%PEG Buffer A稀釋酶標抗體至1∶800 ，加入96孔板 ，100μl/孔 ，放37℃,1小時 。
5. 顯色 ：Buffer A衝洗96孔板五次 ，pH5.4檸檬酸緩衝液溶解底物(ABTS),0.2mg/ml,加3%H2O2,2μl/ml ，加入96孔板 ，100μ/孔 ，室溫下或37℃顯色 。
四 、注意事項
1. 待檢標本如為血清 ，應采用一次性容器 ，血液采集後盡快(6小時以內)分離血清 。
2. 封閉液或抗體稀釋液應新鮮配製或凍存 。
規格 ：    Multi-class antibodies    anti-Cathepsin L  組織蛋白酶L抗體     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-G/CG /FITC  熒光素標記組織蛋白酶G抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-G/CG /FITC  熒光素標記組織蛋白酶G抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-H/CH /FITC  熒光素標記組織蛋白酶H抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-H/CH /FITC  熒光素標記組織蛋白酶H抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-K/CK /FITC  熒光素標記組織蛋白酶K抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    Anti-cath-K/CK /FITC  熒光素標記組織蛋白酶K抗體IgG     0.2ml
規格 ：    Multi-class antibodies    anti-cath-L/CL /FITC  熒光素標記組織蛋白酶L抗體IgG     0.2ml

 

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