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小鼠白介素1β酶聯免疫分析試劑盒檢測原理
點擊次數 :812 更新時間 :2017-03-21

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平 。用純化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗體包被微孔板 ,製成固相抗體 ,往包被單抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β) ,再與HRP 標記的白介素1β (IL-1β)抗體結合 ,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物 ,經過*洗滌後加底物TMB 顯色 。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色 ,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色 。顏色的深淺和樣品中的白介素1β (IL-1β)呈正相關 。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值) ,通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素1β (IL-1β)濃度 。

小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒加強各個環節的質量保證 ,充分發揮其方法學的優點 ,確保ELISA試驗結果 。而本法不僅可以用來測定抗體 ,也可用於測定體液中的循環抗原 ,所以也是一種早期診斷的良好方法 。
小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒在實驗過程中 ,能更有效的保持試劑穩定 ,並且容易保存 ,其操作方法簡單 ,結果判定比同類產品更客觀更具優勢 。
關於樣本處理那些事 :
(1)血清 :室溫血液自然凝固10-20分鍾 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如出現沉澱 ,應再次離心 。
(2)血漿 :小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑 ,混合10-20分鍾後 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如有沉澱形成 ,應該再次離心 。
(3)尿液 :用無菌管收集 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如有沉澱形成 ,應再次離心 。胸腹水 、腦脊液參照實行 。
(4)細胞培養上清 :檢測分泌性的成份時 ,用無菌管收集 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 。檢測細胞內的成份時 ,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液 ,細胞濃度達到100萬/ml左右 。人組胺檢測試劑盒品牌通過反複凍融 ,以使細胞破壞並放出細胞內成份 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 。保存過程中如有沉澱形成 ,應再次離心 。
(5)組織標本 :切割標本後 ,稱取重量 。加入一定量的PBS ,PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存備用 。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度 。加入一定量的PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標本勻漿充分 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 。分裝後一份待檢測 ,其餘冷凍備用 。
(6)標本采集後盡早進行提取 ,提取按相關文獻進行 ,提取後應盡快進行實驗 。若不能馬上進行試驗 ,可將標本放於-20℃保存 ,但應避免反複凍融.
(7)不能檢測含NaN3的樣品 ,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性 。

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