本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平 。用純化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗體包被微孔板 ,製成固相抗體 ,往包被單抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β) ,再與HRP 標記的白介素1β (IL-1β)抗體結合 ,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物 ,經過*洗滌後加底物TMB 顯色 。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色 ,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色 。顏色的深淺和樣品中的白介素1β (IL-1β)呈正相關 。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值) ,通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素1β (IL-1β)濃度 。
小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒加強各個環節的質量保證
,充分發揮其方法學的優點
,確保ELISA試驗結果
。而本法不僅可以用來測定抗體
,也可用於測定體液中的循環抗原
,所以也是一種早期診斷的良好方法
。
小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒在實驗過程中
,能更有效的保持試劑穩定
,並且容易保存
,其操作方法簡單
,結果判定比同類產品更客觀更具優勢
。
關於樣本處理那些事
:
(1)血清
:室溫血液自然凝固10-20分鍾
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如出現沉澱
,應再次離心
。
(2)血漿
:小鼠白介素-1β酶聯免疫試劑盒應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑
,混合10-20分鍾後
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如有沉澱形成
,應該再次離心
。
(3)尿液
:用無菌管收集
,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
,保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。胸腹水
、腦脊液參照實行
。
(4)細胞培養上清
:檢測分泌性的成份時
,用無菌管收集
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。檢測細胞內的成份時
,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液
,細胞濃度達到100萬/ml左右
。人組胺檢測試劑盒品牌通過反複凍融
,以使細胞破壞並放出細胞內成份
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
(5)組織標本
:切割標本後
,稱取重量
。加入一定量的PBS
,PH7.4
。用液氮迅速冷凍保存備用
。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度
。加入一定量的PBS(PH7.4)
,用手工或勻漿器將標本勻漿充分
。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)
。仔細收集上清
。分裝後一份待檢測
,其餘冷凍備用
。
(6)標本采集後盡早進行提取
,提取按相關文獻進行
,提取後應盡快進行實驗
。若不能馬上進行試驗
,可將標本放於-20℃保存
,但應避免反複凍融.
(7)不能檢測含NaN3的樣品
,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性
。