抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?甲狀腺冰凍切片操作方法

1. 主要試劑與儀器

0.5%氨水返藍液 、Gill改良蘇木精染液 、0.5%～1%鹽酸乙醇分化液 、1%醇溶性伊紅染液 、甲醇醋酸混合固定液（甲醇50ml 、冰醋酸2.5ml） 、各梯度乙醇溶液 、二甲苯及中性樹膠均

2.操作方法

冷凍機溫度為-15℃～-18℃ 。將新鮮活體組織塊切成1.5cm×1.5cm×0.3cm大小 ，速凍 ，切片厚度為5μm 。粗修組織塊 ，然後細修切麵 ，再用戴手套手的大拇指或大魚際肌在切麵上溫暖2～3s ，動作稍慢而勻速 。切片製成後立即放入甲醇醋酸混合固定液固定0.5～1min後水洗 ，Gill改良蘇木精染胞核1～3min後水洗 ，0.5%～1%鹽酸乙醇分化液分化1～2次後水洗 ，0.5%氨水返藍2s後水洗 ，1%醇溶性伊紅染胞質10s ，逐級梯度乙醇快速脫水 ，中性樹膠封固[1-2] 。

3.結果

3.1 取材浸水對組織HE染色效果的影響

組織浸水後鏡下出現冰晶及類似氣泡樣的“黑水珠” ，按壓不會消失 ；未浸水組織結構完整 ，未見上述現象 。

3.2 冷凍溫度對組織

冷凍溫度過低時 ，鏡下出現甲狀腺膠質染色不均勻 ，甚至出現多量大小不一的空泡 ；溫度適宜時 ，組織結構清晰完整 、細胞無明顯膨脹 、極少有冰晶形成 。

3.3 複溫對組織

HE染色效果未複溫時 ，鏡下顯示濾泡與濾泡之間出現收縮裂隙 ；複溫後無收縮裂隙情況出現 。

3.4 固定液對組織

固定液中未加冰醋酸時 ，鏡下顯示膠質收縮 ，皺褶形成 ，膠質與濾泡上皮脫落 ，出現空暈 ；加冰醋酸後 ，組織結構清晰 ，核著色清楚 ，核漿對比度好 ，組織無皺縮現象發生 。

3.5 染色對組織

染色不充分時 ，鏡下顯示組織色澤偏紅 ，核對比度不強 ，影響診斷 ；染色充分後 ，鏡下組織結構清晰完整 ，核漿紅藍對比鮮明 。

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