影響抗原抗體反應
(一)反應物自身的因素
1.抗體
:不同來源的抗體
,反應性各有差異
,抗體的濃度
、特異性和親和力都影響抗體抗原反應
,為提高試驗的可靠性
,應選擇高特異性
、高親和力的抗體作診斷試劑
。等價帶的寬窄也影響抗原抗體複合物的形成
,單克隆抗體不適用於沉澱反應
。
2.抗原
:抗原的理化性狀
、分子量
、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果
。顆粒性抗原出現凝集反應
,可溶性抗原出現沉澱反應
,單價抗原與相應抗體結合不出現沉澱現象
。
(二)反應環境條件
1.電解質
:抗原與抗體發生特異性結合後
,雖由親水膠體變為疏水膠體
,若溶液中無電解質參加
,仍不出現可見反應
。為了促成沉澱物或凝集物的形成
,常用0.85%NaCl或各種緩衝液作為抗原及抗體的稀釋液
。
2.酸堿度
:抗原抗體反應必須在合適的pH環境中進行
。蛋白質具有兩性電離性質
,因此每種蛋白質都有固定的等電點
。抗原抗體反應一般在pH6~9進行
,有補體參與的反應pH為7.2~7.4
,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應
。
3.溫度
:在一定範圍內
,溫度升高可加速分子運動
,抗原與抗體碰撞機會增多
,使反應加速
。一般為15℃~40℃
,常用的抗原抗體反應溫度為37℃
,溫度如高於56℃
,可導致已結合的抗原抗體再解離
,甚至變性或破壞
。每種試驗都有其*的zui適反應溫度要求
。此外
,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸
,加速反應
。