一 、原代的培養

   1.紫外消毒30min後關閉紫外燈 ，開啟超淨台正常工作狀態 ，用酒精消毒操作者的雙手 。

   2.將所需的培養基確保瓶身幹淨後放於工作台麵內 ，點燃酒精燈 ，將培養基瓶口用酒精棉球擦拭後 ，再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次 ，旋開瓶蓋後再次分別消毒瓶口和瓶蓋 ，分別放於酒精燈的兩側 。特別是將培養基瓶放於斜架上 ，瓶口對準酒精燈 ，且放在距離酒精燈zui近的位置 ，瓶蓋置於酒精燈的另一側 。

   3.取1個高壓後的新培養瓶 ，瓶口在酒精燈上消毒2-3次 ，旋開後分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次分別放於酒精燈兩側 ，把保種管在超淨台外用酒精棉球擦拭下2/3後拿進超淨台內在酒精燈上消毒保種管口2-3次放於台麵左手邊 ，取1ml移液器快速移動在酒精燈上消毒1-2次 ，然後再裝上槍頭吸取保種管內的液 ，懸空移入培養瓶內 。

   4.拿出1支高壓後的5ml定量移液管 ，在酒精燈上灼燒尾部後裝於電動移液器上 ，再次放於酒精燈上灼燒整個定量移液管管身2-3次，懸空進入培養基瓶內吸取4ml培養基再懸空移入培養瓶內 ，將培養瓶瓶口和瓶蓋在酒精燈上消毒2-3次後擰緊平放 ，在瓶身做好實驗標記 。

  5.將培養基瓶口和瓶蓋消毒2-3次後擰緊 ，熄滅酒精燈 ，整理實驗台麵 ，取出實驗試劑及汙缸等 ，關閉超淨工作台 。

  6.將培養瓶放於28℃,5%CO2的培養箱內培養 ，旋開瓶口少許 。

注意整個培養箱底托盤內一定要放高壓後的水 ，且定期更換確保無菌 。

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