老哥俱乐部

(一)pH调整液

    合成培养液大多呈弱酸性，而生长的zui适pH值为7．0～7．2，因此使用培养液时要调整pH
，并注意培养过程中pH的变化
，及时换液。常用的pH调整液包括NaHCO3溶液和Hepes缓冲液。

1.NaHCO3溶液NaHCO3是培养基中必须添加的成分，一般情况下按照说明书要求添加，以保证培养基在5％CO2的环境中pH达到设计标准。通常情况下，培养液添加血清后可能偏酸
，可临时用NaHCO3溶液调节其pH值。常用的NaHC3溶液浓度为7．4％、5．6％、3．7％三种。调节pH时
，NaHCO3溶液要逐滴加入，并不时摇动培养液，以防止加入过量。若pH过高时，可用高压灭菌10％醋酸溶液或通人CO2气体调节
。配制时用三蒸水溶解后，过滤除菌，分装备用。亦可使用高压蒸气灭菌，密封
，4℃冰箱保存。

2．Hepes缓冲液是一种可以保持培养过程中pH值较长时间稳定的氢离子缓冲剂
。一般在克隆化培养时要添加H印es缓冲液
。通常使用浓度为10～15mmol／L。配制时，称取所需的Hepes
，用培养液溶解后

，用1mmol／L NaOH调节pH到7．O，过滤除菌分装后备用。

(二)抗生素液

    细胞培养中经常使用的抗生素是青，俗称“双抗溶液”，可以预防绝大多数的细菌污染。使用的终浓度为100U／ml
，为100μg／ml
。常用Hanks或PBS配制为100倍浓缩液．分装冻存
，使用前经稀释后加入到培养液中。

(三)补充液

    在代谢过程中起重要作用

，合成培养基中都要添加
。易降解，应在使用前添加。常配制100倍浓度的浓缩液，浓度为200mmol／L。使用时
，每lOOml培养液中加入0．5～2ml浓缩液，终浓度为1～4mmol／L。

上一篇 异核体的形成 下一篇 细胞增殖曲线的测定