細胞處理 ：
1 、複蘇細胞 ：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍 ，加入4mL培養基混合均勻 。在1000RPM條件下離4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養基後吹勻 。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中 ，加入約8ml培養基 ，培養過夜） 。第二天換液並檢查細胞密度 。
2 、細胞傳代 ：如果細胞密度達80%-90% ，即可進行傳代培養 。
對於貼壁細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
1)棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次 。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中 ，置於37℃培養箱中消化1-2分鍾 ，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況 ，若細胞大部分變圓並脫落 ，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化 。
3)按6-8ml/瓶補加培養基 ，輕輕打勻後吸出 ，在1000RPM條件下離4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養液後吹勻 。
4)將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
接下來
，細胞在新的培養環境中繼續生長
，需要密切關注其狀態
。每天定時觀察細胞形態
、密度以及培養基的顏色變化
，確保無細菌或黴菌汙染
。若培養基因細胞代謝而變黃
，應及時更換新鮮培養基
，以維持良好的生長環境
。
在細胞培養過程中
，溫度
、濕度及CO₂濃度的控製至關重要
。通常
，哺乳動物細胞培養在37℃
、5% CO₂及飽和濕度的條件下進行
，這樣的條件能夠模擬體內環境
，促進細胞增殖
。定期檢查培養箱的性能參數
，確保它們處於最佳狀態
，是細胞培養成功的關鍵
。
此外
，細胞的健康狀態還需通過細胞活力檢測來評估
。常用的方法包括台盼藍染色法
，通過染色區分活細胞與死細胞
，從而計算出細胞活力百分比
。保持高細胞活力對於後續實驗
，如細胞轉染
、細胞分化研究或藥物篩選等
，都是至關重要的
。
當細胞生長至適宜密度時
，根據實驗需求
，可進行凍存保藏或進一步實驗處理
。細胞凍存時
，需先配置含有適當比例血清和DMSO的凍存液
，將細胞懸液與凍存液混合後
，置於程序降溫盒中
，逐步降溫至-80℃超低溫冰箱
，最終轉移至液氮罐中長期保存
。這一過程確保了細胞的長期存活和實驗的可重複性
。
綜上所述
，細胞處理是一個精細且需要耐心的工作
，從複蘇到傳代再到後續的維護
，每一步都需嚴格遵循操作規程
，以確保細胞的健康生長和實驗的成功進行
。