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人骨成型蛋白7(BMP-7)檢測ELISA試劑盒使用方法
點擊次數 :458 更新時間 :2022-10-12

使用方法:


1. 標準品的稀釋 :本試劑盒提供原倍標準品一支 ,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋 。


5號標準品              150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液


4號標準品              150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液


3號標準品             150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液


2號標準品             150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液


1號標準品             150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


2. 加樣 :分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ,其餘各步操作相同) 、標準孔 、待測樣品孔 。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl ,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ,然後再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於         酶標板孔底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。


3. 溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。  


4. 配液 :將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用


5. 洗滌 :小心揭掉封板膜 ,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液 ,靜置30後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。


6. 加酶 :每孔加入酶標試劑50μl ,空白孔除外 。


7. 溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。  


8. 洗滌 :小心揭掉封板膜 ,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液 ,靜置30後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl ,輕輕震蕩混勻 ,37℃避光顯色15分鍾.


10. 終止 :每孔加終止液50μl ,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。


11. 測定 :以空白空調零 ,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行 。

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