樣本處理及要求 :
1. 血清 :室溫血液自然凝固10-20分鍾 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如出現沉澱 ,應再次離心 。
2. 血漿 :應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑 ,混合10-20分鍾後 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如有沉澱形成 ,應該再次離心 。
3. 尿液 :用無菌管收集 ,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 ,保存過程中如有沉澱形成 ,應再次離心 。胸腹水 、腦脊液參照實行 。
4. 細胞培養上清 :檢測分泌性的成份時 ,用無菌管收集 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 。檢測細胞內的成份時 ,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液 ,細胞濃度達到
100萬/ml左右 。通過反複凍融 ,以使細胞破壞並放出細胞內成份 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成 ,應再次離心 。
5. 組織標本 :切割標本後 ,稱取重量 。加入一定量的PBS ,PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存備用 。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度 。加入一定量的PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標本勻漿充分 。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清 。分裝後一份待檢測 ,其餘冷凍備用 。
6. 標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行 ,提取後應盡快進行實驗 。若不能馬上進行試驗 ,可將標本放於-20℃保存 ,但應避免反複凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品 ,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性 。