對於貼壁細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
1. 棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次 。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中 ，置於37℃培養箱中消化1-2分鍾 ，然後在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況 ，若細胞大部分變圓並脫落 ，迅速拿回操作台 ，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化 。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基 ，輕輕打勻後吸出 ，在1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養液後吹勻 。
4. 將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
對於懸浮細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
方法一 ：收集細胞 ，1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養液後吹勻 ，將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
方法二 ：可選擇半數換液方式 ，棄去半數培養基後 ，將剩餘細胞懸起 ，將細胞懸液按1 ：2到1 ：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
小鼠結腸成纖維細胞 細胞凍存
待細胞生長狀態良好時 ，可進行小鼠結腸成纖維細胞|細胞凍存 。貼壁細胞凍存時 ，棄去培養基後加入少量yi酶 ，細胞變圓脫落後 ，加入約1ml含血清的培養基後加入凍存管中 ，再添加10%DMSO後進行凍存 。懸浮細胞凍存時 ，應將細胞收集 ，1000RPM條件下離心4分鍾 ，少量保存上清液(防止細胞吸走) ，加入部分新鮮培養基 ，加入到凍存管中 ，在凍存管中加入10%DMSO後進行凍存 。
小鼠結腸成纖維細胞 細胞複蘇的原則
快速融化 ：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃ ，使小鼠結腸成纖維細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化 ，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶 ，對細胞造成損害 。